干細胞的轉染

很多時候，進行細胞轉染的研究人員必須進行謹慎的平衡。實現足夠高的轉染水平以提供可靠的結果，同時又不在此過程中殺死太多細胞，是一項持續的斗爭。對于從事干細胞研究的科學家來說，這些問題更具挑戰性，因為它們的轉染率歷來較低（通常低于5%）。 

許多科學家現在正在尋求利用干細胞進行基于CRISPR的基因編輯，以在細胞水平上對疾病產生新的理解。有一種高效可靠的方法來轉染干細胞，以實現基因組編輯的新發現，這一點從未如此重要。現在非常需要針對CRISPR應用優化干細胞轉染方案。允許干細胞維持其多能狀態并最大限度地減少轉染的細胞毒性的方案至關重要。

我們的支鏈兩親性肽膠囊（BAPC™）克服了脂質體載體的問題，有助于最大限度地減少轉染干細胞的壓力。這與誘導多能干細胞（iPSCs）尤其相關，它們對環境變化非常敏感，對壓力反應不佳。

將熒光激活細胞分選 (FACS) 分選的干細胞（輻射敏感細胞）培養 6 小時，并與 BAPC 和 Atto 633 一起孵育過夜。然后用固定在 4% FFA 中的培養基洗滌細胞兩次。 DMSO 處理的細胞用作陰性對照。在上圖中，比例尺代表 10 微米，白色箭頭代表 BAPC 陽性細胞。

Phoreus™ BAPtofect™-25 細胞轉染試劑盒最大限度地減少了干細胞轉染的壓力。由于 BAPC 是由合成的、天然存在的肽構成的，它們是自組裝的、水溶性的、對細胞無毒，并且不會觸發免疫系統反應。

Phoreus目前正在與行業合作伙伴合作開發iPSC干細胞轉染的新方案。 雖然這項初步工作已經成功地證明了干細胞對染色BAPC的有效吸收，但目前正在進行研究，以證明核酸的保護遞送導致干細胞成功轉化。這些新協議將促進CRISPR Cas-9的遞送，并指導RNA用于干細胞中的基因編輯，從而在細胞水平上對疾病產生令人興奮的新理解。