cortecnet的大腸桿菌蛋白表達簡介

細菌中的蛋白質表達是迄今為止制備穩定同位素富集蛋白質樣品的常用方法。大腸桿菌是表達重組蛋白常用的生物體，是一種培養時間短的宿主。大腸桿菌能夠使用簡單的分子技術進行直接的基因操作，并且細胞對氘表現出良好的耐受性，從而可以使用13 C、 15 N 和2 H

在厭氧條件下，大腸桿菌可以使用葡萄糖、乙酸鹽和甘油作為其碳源以及銨鹽作為其氮源來合成所有 20 種必需氨基酸。使用標記的基本介質試劑，例如氧化氘、 15 N 銨鹽、 13 C 6、D 7或13 C 6 /D 7標記的葡萄糖，可以直接生產均勻標記的蛋白質樣品。

使用相應的標記試劑獲得均勻的標記

I SOGRO 是一種源自藻類裂解物的復雜粉末狀豐富培養基，旨在增強細菌中的蛋白質表達。 ISOGRO 粉末具有13 C、 15 N 和2 H 標記的各種組合，可用作獨立培養基或基本培養基的補充，以提高蛋白質產量。

A。 p38 生長的 SDS-PAGE。數據由美國大學化學/生物化學系 Jeffrey W. Peng 博士提供美國印第安納州圣母院。 b. pLysS 中的心肌肌鈣蛋白 cTnC(1-89)。細胞在 37°C 搖瓶中生長。紅色曲線是 ISOGRO 補充的最小介質，黑色曲線是單獨的最小介質。

如果使用大腸桿菌無法成功進行蛋白質表達，則可以考慮其他選擇，例如昆蟲細胞、哺乳動物細胞或無細胞表達系統。