protean重組蛋白——Pro3C HRV-3C 蛋白酶介紹

Pro3C (HRV-3C, Prescission) 蛋白酶是一種來(lái)自人鼻病毒 3C (HRV3C) 的轉(zhuǎn)基因序列特異性半胱氨酸蛋白酶。由于其高序列特異性，它經(jīng)常用于融合蛋白的切割以及體外和體內(nèi)重組蛋白的標(biāo)簽去除。

這種重組蛋白酶是人鼻病毒 3C 的基因改良版本。它包含位于蛋白質(zhì) N 末端的 His6 標(biāo)簽，使其能夠固定在 Ni 基親和樹(shù)脂上并從裂解反應(yīng)中去除。它在很寬的溫度范圍內(nèi)（4-34°C）都具有活性。最佳溫度為 30°C，但對(duì)于溫度敏感目標(biāo)，它在 4°C 時(shí)也能發(fā)揮作用。優(yōu)選的識(shí)別序列是Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln|Gly-Pro (LEVLFQ|GP)。請(qǐng)使用我們的3C 底物 #1409或FRET 底物作為陽(yáng)性對(duì)照。

應(yīng)用

蛋白質(zhì)純化后從融合蛋白中切割親和標(biāo)簽。直接在溶液中或固定在親和樹(shù)脂上切割融合蛋白。 Protean Ltd. 提供的酶是在符合 ISO 9001 和 ISO 13485 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的認(rèn)證環(huán)境中生產(chǎn)的，符合下游 GMP 認(rèn)證流程的使用條件。

純化方法

親和層析

公式

50 mM Tris pH 7.0、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM DTT、50% 甘油

特異性

其八氨基酸序列具有高度特異性和活性，且脫靶效應(yīng)最小。活性取決于靶蛋白的類(lèi)型。應(yīng)針對(duì)每種目標(biāo)蛋白測(cè)試最佳酶用量。

貯存

-20°C，請(qǐng)勿儲(chǔ)存在-80°C