ubiquigent脫輔基化酶-USP5簡述

目錄號(hào)：64-0002-050

產(chǎn)品大小：50克

登錄號(hào)：P45974

表達(dá)的殘基：1-858

Certificate of Analysis Size：50克

種類：人類

來源：E.大腸桿菌表達(dá)

量：50克

儲(chǔ)存：-70攝氏度

Concentration：0.5毫克/毫升

制定：50 mM HEPES pH 7.5、150 mM氯化鈉、2 mM二硫蘇糖醇、10%甘油

分子量：約98千道爾頓

穩(wěn)定性：-70攝氏度下12個(gè)月；根據(jù)需要等分

蛋白質(zhì)序列：登錄號(hào):P45974。有關(guān)完整的蛋白質(zhì)序列信息。

QA；蛋白質(zhì)鑒定：質(zhì)譜證實(shí)。

去泛素化酶分析:通過測(cè)定熒光的增加來驗(yàn)證His-USP5的活性，所述熒光的增加是酶催化熒光底物泛素-羅丹明110-甘氨酸產(chǎn)生泛素和羅丹明110-甘氨酸的結(jié)果。比較了His-USP5存在或不存在時(shí)底物的溫育，證實(shí)了His-USP5的去雙堿基化活性。

背景：去泛素化酶（DUBs）調(diào)節(jié)泛素依賴性信號(hào)通路。DUBs的活動(dòng)包括從前體分子產(chǎn)生游離泛素，在底物降解后再循環(huán)泛素以維持細(xì)胞泛素穩(wěn)態(tài)，以及通過鏈編輯去除泛素或泛素樣蛋白（UBL）修飾以拯救蛋白質(zhì)免受蛋白酶體降解或影響細(xì)胞信號(hào)事件（Komander以及其他人。, 2009).有兩類主要的DUB，半胱氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。泛素特異性加工蛋白酶5（USP5）是半胱氨酸蛋白酶家族的成員，人類基因的克隆首先由Wilkinson描述以及其他人。(1995).USP5蛋白包含一個(gè)N末端鋅指泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域（ZNF-UBP）、一個(gè)泛素特異性加工蛋白酶（UBP）結(jié)構(gòu)域（包含活性位點(diǎn)cys和his盒）和兩個(gè)泛素相關(guān)結(jié)構(gòu)域（UBA1和uba 2）（Reyes-Turcu以及其他人。, 2006).ZNF-UBP結(jié)構(gòu)域的晶體結(jié)構(gòu)揭示了一個(gè)深的結(jié)合口袋，其中插入了泛素的C-末端二甘氨酸基序，這解釋了USP對(duì)多泛素近端亞基上未修飾的C-末端的特異性（Reyes-Turcu以及其他人。, 2006).最近，USP5被鑒定與26S蛋白酶體以及其他已知為UBL相互作用組（Besche）的蛋白質(zhì)相關(guān)以及其他人., 2009).