核酸凝膠染料應(yīng)該如何進行選擇？

SPEED Biosystems 擁有一系列核酸凝膠染料，包括用于凝膠前和凝膠后染色的 GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™，以及用于電泳前與核酸混合的 SafeGreen™ 和 SafeRed™ 上樣染料。這些染料是下一代熒光核酸凝膠染料，旨在替代高致突變性溴化乙錠 （EB）。這些染料兼具高靈敏度、低毒性和高穩(wěn)定性，優(yōu)于 EB。EB 因其成本低且通常具有足夠的靈敏度而被廣泛用于核酸凝膠染色。然而，EB 具有高度誘變性。與凈化和廢物處理相關(guān)的安全隱患和成本最終會使染料變得昂貴且使用不便。

用于凝膠前和凝膠后染色的凝膠染料（GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™）

優(yōu)勢

★ 比 EB 更安全。Ames 試驗和其他試驗顯示無突變性和無細胞毒性。

★ 常溫下穩(wěn)定。

★ 與標(biāo)準(zhǔn)藍光 LED 和 UV 透射儀兼容。

★ 與藍光一起使用可減少凝膠切除和后續(xù)克隆的誘變。

圖 1.使用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的凝膠染色結(jié)果（左圖），以及使用 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 的比較結(jié)果（右圖）。左圖：將 1 kb DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)（NEB，貨號 # N0468S）的兩倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng（從左到右）的量分分 3 個泳道上加載到每塊凝膠上，然后用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 進行后染色。右圖：結(jié)果顯示 GreenView™ 與 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 具有相似的靈敏度，GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的靈敏度要好得多。

圖 2.使用 RedView™ 和 GelRed™ 進行凝膠染色結(jié)果。將 1 kb DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)品的 2 倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng（從左到右）的量分裝到 3 個泳道的每塊凝膠上，然后分別用 RedView™ 和 GelRed™ 進行后染色。結(jié)果顯示 RedView™ 與 GelRed™ 具有相似的靈敏度。

除了比 EB 更安全之外，與 SYBR Safe DNA 凝膠染料相比，GreenView™、GreenView™ Plus 和 RedView™ 的細胞通透性降低，使其更安全（圖 3）。

圖 3.使用 SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 進行細胞通透性測試。Hela 細胞在 37？使用 1X SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 30 分鐘。

GreenView Plus 和 RedView 無法穿透細胞膜以結(jié)合活細胞中的 DNA，并且比 SYBR Safe 安全得多，后者可快速進入細胞并對細胞核進行染色。

如何選擇適合您的 DNA 染色劑？

凝膠上樣染料（SafeGreen™ 和 SafeRed™）

優(yōu)勢

★ 在 6X 上樣緩沖液中配制，即用型。

★ 安全無毒，是 EB 的替代品。

圖 4.使用 SafeGreen™（左圖）和 SafeRed™（右）與 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)混合的凝膠染色結(jié)果。

SafeGreen™ 和 SafeRed™ 經(jīng)過專門設(shè)計，不滲透細胞膜，從而通過防止染料進入活細胞來降低遺傳毒性（圖 5）

圖 5.使用 SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 進行細胞通透性檢測。將 Hela 細胞在 37oC 下與 1X SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 一起孵育 30 分鐘。SafeGreen™ 和 SafeRed™ 無法穿透細胞膜結(jié)合活細胞中的 DNA，比 SYBR Safe™ 安全得多，后者可快速進入細胞并對細胞核進行染色。

相關(guān)產(chǎn)品

GreenView™ DNA Gel Stain   貨號 LYF1001

GreenView™ Plus DNA Gel Stain 貨號 LYF1002

GreenView™ Ultra DNA Gel Stain 貨號 LYF1003

RedView™ DNA Gel Stain  貨號 LYF1004

SafeGreen™ Loading Dye  貨號 LYF1005

SafeRed™ Loading Dye  貨號 LYF1006