Pfu Polymerase (Pfu聚合酶)

Pfu DNA聚合酶來自超嗜熱古生菌激烈熱球菌，與其他熱穩定聚合酶相比，具有優異的熱穩定性和校正特性。其分子量為90 kD。它可以擴增高達2kb的DNA靶。拉伸速度為0.2 ~ 0.4 kb/min(70 ~ 75℃)。Pfu DNA聚合酶具有3’至5’核酸外切酶校對活性，使聚合酶能夠糾正核苷酸錯摻錯誤。這意味著Pfu DNA聚合酶產生的PCR片段比Taq產生的PCR插入片段具有更少的錯誤。在PCR反應中使用Pfu DNA聚合酶會產生平端PCR產物，這是克隆到平端載體的理想選擇。Pfu DNA聚合酶對于需要高保真度DNA合成的技術是*的。

存儲器緩沖區
20毫米Tris。鹽酸(pH8.0)，100毫米KCl，3毫米氯化鎂2、1mM DTT、0.1% Nonidet P-40、0.1%吐溫20、0.2mg/ml BSA、50% (v/v)甘油。

10X Pfu緩沖器
200毫米Tris-HCl (pH8.8)，100毫米KCl，100毫米(NH4)2因此420毫米MgSO4、1% Triton X-100和1毫克/毫升BSA。

單位定義
一個酶單位(U)被定義為使用鯡魚精DNA作為底物，在70℃下30分鐘內催化10納摩爾脫氧核糖核苷酸摻入酸不溶性物質所需的酶量。

A 2X mastermix Pfu聚合酶也是可用的。

Taq聚合酶也是可用的
 

特征

• 3’-5’核酸外切酶活性提供了低錯誤率
• 已知最耐熱的DNA聚合酶之一
• 缺乏延伸酶活性意味著沒有不想要的3’突出端
• 適合平端PCR克隆
• 最佳溫度接近75℃
• 在98℃下孵育1小時后，活性為95%

應用程序

• 高保真PCR和引物延伸反應
• 用于克隆到平端載體的高保真PCR。
• 定點誘變。